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【关键词】;内皮缩血管肽类
Effects of Ginaton on hypoxiainduced endothelin secretion from human aortic endothelial cells
【Abstract】 AIM: To explore the effects of Ginaton at different concentrations on the hypoxiainduced endothelin (ET) secretion from cultured vascular endothelial cells (VECs). METHODS:Cultured VECs were divided into 5 groups: control group, simple hypoxia group, highconcentration Ginaton group, moderateconcentrationGinaton group, and lowconcentration Ginaton group. For hypoxia, all groups except control group were put in a hypobaric chamber at the height of 5000 m for 30 min.The ET contents in supernatant of VECs before hypoxia and 0.5 h after hypoxia, 6 h after hypoxia as well as 24 h after hypoxia were measured with radioimmunoassay. RESULTS:① Simple hypoxia promoted VECs secretion of ET and ET content increased significantly at 0.5 h after hypoxia and reached the peak at 6 h (P<0.01). ② Ginaton inhibited VECs secretion of ET induced by hypoxia. At the time of 0.5 h after hypoxia, highconcentration Ginaton was more effective thanmoderateconcentration and lowconcentration Ginaton (P<0.01). At the time of 6 h and 24 h after hypoxia, moderateconcentration Ginaton was more significantly effective than highconcentration and lowconcentration Ginaton (P<0.05). CONCLUSION:Ginaton has significant protective effects on hypoxiainduced ET secretion from cultured VECs and the effects of moderateconcentration Ginaton are more obvious compared with those of 无忧论文 【http://www.uklunwen.com】highconcentration and lowconcentration Ginaton.
【Keywords】endothelial, vascular/cytology; endothelins; ginaton; anoxia
【摘要】 目的: 探讨不同浓度金钠多对由缺氧所致培养的血管内皮细胞分泌内皮素功能的影响. 方法: 将培养的血管内皮细胞分为空白对照组、单纯缺氧组、缺氧加高浓度金钠多组、缺氧加中浓度金钠多组和缺氧加低浓度金钠多组. 采用低压舱上升至5000 m高度、停留30 min,对培养的血管内皮细胞进行缺氧. 用放射免疫法测定缺氧前和缺氧后0.5, 6, 24 h各组细胞培养液中内皮素含量. 结果: ① 急性缺氧可显著促进血管内皮细胞分泌内皮素,缺氧后0.5 h内皮素含量即显著升高,于缺氧后6h分泌内皮素含量最高. ② 金钠多能明显抑制缺氧促血管内皮细胞分泌内皮素的作用,在缺氧后0.5 h表现出高浓度金钠多强于中浓度和低浓度金钠多组,在缺氧后6和24 h则中浓度金钠多的作用要强于高浓度和低浓度组. 结论: 金钠多能显著抑制缺氧促血管内皮细胞分泌内皮素的作用,且中浓度金钠多较高浓度和低浓度金钠多作用更明显.
【关键词】 内皮,血管/细胞学;内皮缩血管肽类;金钠多;缺氧
0引言
缺氧是多种疾病和损伤发生发展过程中的中心环节之一. 缺氧对血管内皮细胞(vascularendothelialcells, VEC)的结构和功能有着复杂和明显的影响,缺氧可刺激血管内皮细胞生成和释放内皮素(endothelin, ET)增加,血浆ET含量明显增高. 有关药物如内皮素受体拮抗剂、内皮素转化酶抑制剂及中药对血管内皮细胞分泌ET的影响有不少报道[1],但是金钠多对缺氧所致血管内皮细胞分泌ET的影响尚未见报道. 我们采用培养的人大动脉血管内皮细胞,通过低压舱模拟缺氧,分别观察缺氧对血管内皮细胞分泌ET的影响及不同浓度金钠多的保护作用.
1材料和方法
1.1材料
低压舱(由本院高压氧治疗中心提供),内皮细胞采用由CBI公司提供的人大动脉血管内皮细胞体系,培养液及内皮细胞生长因子由CBI 公司配套提供,金钠多(德国威玛舒培博士药厂)、内皮素放免试剂盒(由华英所提供). 细胞取回后按照常规方法进行细胞复苏,调整细胞合适浓度,接种于75 cm2细胞培养瓶中,放置于细胞培养箱中进行培养,待细胞长满瓶底后,用胰酶消化、传代. 当细胞传至第3代时,将细胞接种于24孔细胞培养板中(接种密度为5000 cell/cm2),继续培养,待细胞生长满融合后,准备进行干预实验.
1.2方法
将培养的内皮细胞按每组8例样本分为5组: 对照组、单纯缺氧组、缺氧加高、中、低浓度金钠多组. ① 对照组: 为细胞培养液不加特殊试剂,也不受缺氧因素影响,但于缺氧组缺氧前后相对应的时间点取上清液100 μL,待测定ET浓度;② 单纯缺氧组: 将单纯缺氧组置于低压舱内,上升至5000 m高度,停留30 min,以造成细胞缺氧,缺氧后将细胞放回培养箱中继续培养,分别于缺氧前和缺氧后0.5, 6, 24 h取上清液100 μL. ③ 缺氧加不同浓度金钠多组: 在缺氧加不同浓度金钠多各组的细胞培养液中分别加入金钠多使之终浓度分别为25, 10, 5 mg/L,然后同单纯缺氧组一起置于低压舱内上升至5000 m高度,停留30 min造成缺氧. 分别于缺氧干预前和缺氧干预后0.5, 6, |
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